日生劇場の総収容人数（キャパシティ）は1,330席（オーケストラピット使用時は約1,200席規模に変動）。客席は「1階席」「GC階（グランドサークル席 / 中2階席）」「2階席」の3層構造で設計されています。
日本を代表する建築家・村野藤吾が設計したこの劇場は、有機的なうねりを持つ側壁と天井が特徴で、音響特性は国内屈指のクオリティを誇ります。しかし、視覚面においては「座席エリアによる段差・傾斜の違い」を正しく理解しておく必要があります。
1階席は全23列で構成され、座席は千鳥配置（互い違いの配置）が採用されています。ただし、1列目から6列目付近までは床の傾斜が非常に緩やかに設計されているため、前の座席に座る人の座高によっては舞台中央や役者の足元が遮られるケースが散見されます。視界の抜けが本格的に良くなるのは、段差が階段状にしっかりとつき始める7〜8列目以降です。
左右の壁面沿いに張り出すように設置されたGC階（中2階）は、わずか数十席のみで構成される特殊なバルコニーシート。そして2階席は、すり鉢状の急傾斜が設けられており、A列からL列までどの位置からでも前の観客の頭が被りにくい視界のクリアさを実現しています。
